Wie funktionieren bestimmte gentechnische Methoden, die dringend benötigte Ergebnisse liefern sollen? Welches Verfahren ist für ein Experiment am besten geeignet? Welche Kontrollen sind sinnvoll? Wie genau muss ein Puffer angesetzt werden und wie war das noch mal mit der Reihenfolge im Pipettierschema? In der 5. Auflage dieses bewährten Laborhandbuches werden molekularbiologische Methoden in Form von eindeutigen und reproduzierbaren Arbeitsvorschriften präsentiert, um die täglichen Hürden des Laboralltags zu meistern. Es richtet sich an Bachelor-, Master- oder Diplomstudierende sowie an Technische Assistenten, die neue Methoden etablieren wollen, und erfahrene Wissenschaftler zum schnellen Nachschlagen.Die Autoren sind in Lehre und Forschung oder in der Industrie tätig und geben hier ihr Wissen und ihre jahrelange Laborerfahrung weiter. Die meisten Methoden und Rezepte sind erfolgreich etabliert, andere wurden erst aktuell eingeführt. Zu Beginn eines jeden Abschnitts wird der Leser über die wichtigsten Konzepte informiert. Es folgt ein praktischer Teil mit Arbeitsanleitungen, die Schritt für Schritt das Erlernen und genaue Anwenden der Methoden ermöglichen. Besonderer Wert wurde auf Sicherheitshinweise und das Aufzeigen möglicher Fehlerquellen gelegt.Inhaltsübersicht: - Allgemeine Methoden Gelelektrophoresen Isolierung von DNA PolymeraseKettenreaktion (PCR) Klonierung von cDNA (cDNAPhagenbank) Klonierung von genomischer DNA (genomische Genbank) Isolierung und Markierung von RNA RNAInterference Gewebepräparation Detektion von Protein und Nucleinsäure auf Membran Detektion von mRNA und Protein in situ Transfektion von Säugerzellen Transformationsmethoden für filamentöse Pilze Genexpression in E. coli und Insektenzellen: Produktion und Reinigung rekombinanter Proteine Das Pichia pastorisExpressionssystem Verminderung der Genexpression über RibozymTargeting Analyse der Genregulation PeptidArrays auf Cellulosemembranen Genexpressionsanalyse mit Microrrays Webbasierte Sequenzanalyse und Datenbankabfragen Anhang 1 Sequenzierung von DNA Anhang 2 Proteinidentifizierung und Sequenzierung   In der 5. Auflage wurden neben der Überarbeitung der grundlegenden Kapitel zu den molekularbiologischen Methoden die Kapitel zu RNAi, Bioinformatik und zu Microarrays deutlich ausgebaut. Ein Kapitel zur Fixierung und Aufbereitung von Gewebe ist neu hinzugekommen. Damit ist dieses Buch wiederum ein unverzichtbares Hilfsmittel für jedes molekularbiologische Labor.

Herausgeberinnen:Dr. Monika Jansohn, Studium der Chemie und Chemischen Technologie an der TU Darmstadt. Promotion am Clemens Schöpf-Institut für Organische Chemie und Biochemie. Danach drei Jahre in der Diagnostikfirma Viramed tätig. Schon an der 3. Auflage der "Gentechnischen Methoden" war sie als Redakteurin maßgeblich beteiligt.Dr. Sophie Rothhämel, 1998-2000 Grundstudium Diplom-Biologie in Hannover, 2000-2002 Hauptstudium Biologie an der TU Braunschweig mit Schwerpunkt Genetik/Zellbiologie, 2007 Promotion in der Abteilung Entwicklungsbiologie, TU Braunschweig. 2007-2008 Forschung, Lehre von molekularbiologischen Methoden am Institut für Genetik der TU Braunschweig. Seit 2008 Postdoc im Bereich Entwicklungs- und Molekularbiologie am Albert Einstein College for Medicine, New York (USA).Mit Beiträgen von 22 Fachautoren.

1 Allgemeine Methoden. - 2 Gelelektrophoresen. - 3 Isolierung von DNA. - 4 Polymerase-Kettenreaktion (PCR). - 5 Klonierung von cDNA (cDNA-Genbank). - 6 Klonierung von genomischer DNA (genomische Genbank). - 7 Isolierung und Markierung von RNA. - 8 RNA-Interference. - 9 Gewebepräparation. - 10 Detektion von Protein und Nucleinsäure auf Membran. - 11 In situ-Hybridisierung. - 12 Transfektion von Säugerzellen. - 13 Transformationsmethoden für filamentöse Pilze. - 14 Genexpression in E coli und Insektenzellen: Reinigung rekombinanter Proteine. - 15 Das Pichia pastoris-Expressionssystem. - 16 Verminderung der Genexpression über Ribozym-Targeting. - 17 Analyse der Genregulation. - 18 Peptidarrays auf Cellulosemembranen. - 19 Genexpressionsanalyse mit Microarrays. - 20 Text- und sequenzbasierte Datenbank-Abfragen in der Bioinformatik. - Anhang 1 Sequenzierung von DNA. - Anhang 2 Proteinidentifizierung und Sequenzierung.